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对抗结核病毒的hnp-1短肽序列的研究

浏览次数:发表时间:2020-01-10
      结核病是一种非常严重的慢性传染病,主要由结核杆菌引起的,会导致肺部感染,从而影响肺部健康及淋巴系统,甚至还会影响其它器官及系统,在中国结核病是重点控制病症之一。解决结核病,寻找治疗方案,已经非常迫不及待了。
 
对抗结核病毒的hnp-1短肽序列的研究
 
      但是,结核杆菌病毒的细胞壁非常难以被药物渗透,这样,药物就无法进行相应的治疗。而众所周知,抗微生物肽能通过制造毛孔作用于微生物细胞壁,所以它具有一定的治疗潜力。 
 
      在我们之前的研究中,hnp-1短肽显示了作为抗分枝杆菌治疗药物的的巨大潜力。所以目前研究的重点是开发hnp-1短肽序列,因为它们易于合成,易于修饰,可提高抗菌潜力,降低毒性。
 
      我们开发了各种各样的计算机工具,并使用不同的策略来预测抗微生物肽,例如使用每个氨基酸的抗菌指数和识别抗菌肽中n端和c端的氨基酸模式。而最近,我们的研究小组报道了pep-b基序,即选择用于硅预测服务器的hbd-1基序,并与目前的研究类似,显示了潜在的抗结核杆菌体外活性以及潜在的结核杆菌活性。
 
      利用类似的计算机方法,我们确定了 hnp-1的短氨基酸伸展序列,即具有最高正电荷的 rrygtciyqgrlwaf (pep-h)为潜在的抗菌基序。另一项研究报道,这个氨基酸拉伸形成的保守核心基序是防御素抗菌活性的结构决定因素。 
 
      专家在研究中观察到pep-h基序对体外培养的结核分枝杆菌有杀灭作用,但浓度高于早期报道的hnp-14基序。Pep-h肽就是这样使用的,没有任何氨基酸替代物,而早些时候,专家通过使用各种计算预测服务器,天然产生的抗微生物肽被氨基酸替代物修饰,从而具有比其母肽更好的抗菌潜力。
 
      Hbd3-pep4是由氨基酸替代设计的一种短的hbd-3肽,最近有报道称其在浓度高于hbd-323的情况下抑制耻垢分枝杆菌的生长。但在相同浓度下,用正电荷氨基酸取代的短截短肽ll-37对耻垢分枝杆菌和波氏分枝杆菌的杀灭效果是相同浓度下的ll-37的三倍。值得注意的是,与早期报道的定制序列相比,pep-h在其序列中未经任何修饰,在低浓度(10克 / 毫升)下杀死了90% 的有毒分枝杆菌。 
 
      在0.5 g / mlー30g/ml浓度范围内,pep-h的抗结核菌活性随浓度的增加而增加,但令人惊讶的是,在20g /ml浓度下,分枝杆菌细胞的存活率高于10g/ml,pep-h的最低抑菌浓度在所有实验中均可重复观察到。虽然原因还不清楚,然而,这种偏差在一个或两个浓度,同时进行抗菌素检测,也在早期的研究被观察到。一份关于不同浓度的药蜀葵提取物对嗜酸乳酸杆菌的抑制生长区直径的影响的报告表明,从3%到50%浓度的提取物,微生物生长抑制平均区逐渐增加,而在75%时,抑制生长再次减少,随后在100%时抑制增加。
 
      结核杆菌是一种在巨噬细胞内高效复制的细胞内病原体。研究人员以pbmcs衍生的巨噬细胞作为体外模型,检测pep-h的抗细菌活性。Pep-h显示细胞内分枝杆菌生长明显减少,浓度比体外培养的分枝杆菌低两倍。 
 
      这种分枝杆菌生长量的大幅度下降并不是由于多肽对宿主细胞的细胞毒性作用。 相比之下,hbd3-pep4、 ll-37及其基序 llkkk-18在较高浓度下,只导致鼠类和人巨噬细胞株中耻垢分枝杆菌的存活率下降50-60% 。 
 
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